【www.guakaob.com--留学生招聘】
黄金鲫是中国鱼类育种学专家采用高科技的育种技术培育出来的新兴品种。黄金鲫是三倍体鱼类中的又一个新的物种。成鱼期间体色呈金黄，特别艳丽。因为黄金鲫不孕、不繁、无生殖性能，所以它最大的特点就生长超快。普通的鲫鱼，当年也就能长到3、4两，一斤重的鲫鱼，一般要长3年。而黄金鲫呢，当年就能长到1斤重，2年就可以长3斤。黄金鲫不光膘肥体厚，肉质紧，含肉率高，而且营养特别丰富。它的适温性能广，生存温度由0℃以上至38℃都能正常生存。
黄金鲫是我国水产原种和良种审定委员会最近审定通过的淡水鱼类养殖新品种。该品种以散鳞镜鲤为母本、红鲫为父本，通过远缘杂交获得，可在全国范围内进行池塘养殖。
1．生物学特性黄金鲫体形优美(比彭泽鲫稍宽高且厚实)，体长适中，全身鳞被整齐，鳞片晶莹牢固，适合长途运输。成鱼期体色稍呈金黄。
①含肉率高，营养价值高。黄金鲫膘肥体厚，肉质紧，含肉率高，细刺少，脏器小，鱼肉味道鲜美，营养特别丰富。经国家权威部门化验证明，黄金鲫的含肉率比彭泽鲫高11％以上，且含有23种氨基酸。
②适温范围广。黄金鲫适温范围广，在0～38℃都能正常生存。其生长水温为12—32"E，旺盛生长水温为16～28℃。
③抗寒性强。池水水位保持在1．5米以上，凡达标的水体或水域均能安全越冬。
④抗逆性好。黄金鲫对水环境的要求不严，通常饲养鲤、鲫的用水都能养殖黄金鲫；耗氧率极低，在整个饲养期间．只要池水中的氧气保持在3毫克／升以上，pH值在7—9．4，其摄食、饵料转化率、生长等均无影响。
⑤抗病力强。本场养殖该品种十多年，从未有暴发性、突发性的病害发生，而且仔、幼鱼期的车轮虫、三代虫、指环虫，成鱼期的锚头鳋等寄生性疾病也比其他养殖鱼类少。
⑥吃食时间长。因其吃食时间长，好上钩，是垂钓业的极好品种。早春当水温上升至6℃以上时，该鱼种就开始觅食，晚秋水温下降至5℃左右时还有不同程度的摄食，延长了饲养时间。
⑦容易养殖。黄金鲫性情温和，具有天然集群摄食习性，不用驯化就会上台吃食，且吃食老实、不炸台，减少了饲料的浪费。
2．池塘养殖要点
①池塘条件。池塘可大可小，3亩至几十亩，只要水位能保持在2米以上均可。
②养殖模式。有3种：第一种是由夏花养成大规格鱼种，第二种是由夏花当年养成商品鱼，第三种是成品鱼养殖模式。
③投喂。饵料中蛋白质含量，稚、幼鱼期不少于36％一38％，成鱼期不少于34％一35％，每天投喂2—3次即可，每次投喂1～1．5小时。日投喂量，稚、幼鱼期为池鱼总体重的5％～8％，威鱼期为池鱼总体重的3％-4％。
④池塘管理。每天早晚各巡塘1次。保持池水油绿色、淡绿色。适时开动增氧机，盛夏季节每天要定时开机，阴雨天半夜开机，暴雨过后也要开机。全年池水溶氧量保持在3毫克／升以上的最佳值。
3.黄金鲫的养殖及管理
其一是：饲养黄金鲫的营养指标要求。经历年的饲养实践验证，不需要高于其它鲤、鲫鱼的饲料蛋白指标。稚、幼鱼期的饲料中蛋白质指标不少于36%~38%，成鱼期的饲料中蛋白质指标不小于34%~35%均已达到饱和。但饲料中的动物蛋白必须保证在蛋白总量的1/3以上方可。
其二是：日投饵次数及投喂量。饲养黄金鲫的日投饵次数以每天投喂2~3次即可，每次投喂1~1.5小时。日投喂量，稚、幼鱼期为池鱼总体重的5~8%，成鱼期的日投喂量为池鱼总体重的3~4%为佳。
其三是：饲养黄金鲫的日常管理与饲养其它鲤、鲫鱼类大体相同。在牢牢抓住水、氧、饵三大要素的基础上做好如下几项事宜：
一是每日的早晚要做好细致的巡塘工作。主要是观察池水水位、水质有无变化，池中鱼类有无异常情形等现象。如见有水质变化、池鱼异常，应在“万事先问水”的指导思想下立即采取应急有效的措施加以解决。
二是把握好池水水质。要在保持养殖池的水体中溶氧充足（3mg/L以上）的前提下，做到嫩、活、肥、爽的良好态势。要使池水在颜色上保持油绿、淡绿色为佳的常态。
三是如见有池水水质发生变化或池中鱼类异常，最为应急有效的上策是立即加注新水或换去池内部分老水。
四是要适时的开动增氧机，千方百计的把握住养殖池内水体中的有效溶氧量。力争使全年时的池水溶氧量保持在3mg/L以上的最佳溶氧值。
五是投喂。日常的投喂事宜，首要的是要看当日的天气情况和池水中的溶氧数值方可决定，每口池塘的投喂量，万万不可的是采用那种不用科学、不问青红皂白，日投喂2~3次，日投喂量3%~4%喂完定量拉倒。这种投喂方法不仅浪费饲料，更重要的是败坏了池水的水质和氧气，极易引起池鱼浮头和导致发病。
六是病害防治。笔者认为，在从业大半生淡水鱼类养殖的我，历经实践时常的在教育着我，使我深刻的体会到养殖鱼类发病的主因是在于：
一是池水水体交换尚少；或无规范无节制的开动增氧机致使池水老化或生物量过剩，而导致池水中的溶氧常常处于不足或缺氧状态，久而久之便给致病菌打开了方便的大门。这样的实例，实在是所在多有。
二是不作有规则的预防，待到池鱼发病时才做治疗为时已经晚矣。真正在鱼病预防上应即有效的措施是在全年候的饲养过程中，要不失时机适时有效的，抓住对池水水质的强化管理。例如：换、冲、增的氧气调整，对鱼要有意识的做好定期或不定期的投喂药饵或往池内泼洒药物，这都是上策正规的预防措施。
三是做好池塘日记。池塘日记是实现科学养鱼的基础。所以每天都必须把天气情况、日投喂次数及投饵量、池鱼的生长情况，加注、排、换水时间、次数、池水水位。池鱼有无异常或发病等全过程都应实事求实的记录在池塘日记上。
[生财有道]抓住湖中宝 赚来百万财（2011.1.20）
云南江川有星云湖和抚仙湖两大湖泊，渔业资源丰富，老百姓也依靠当地的资源优势致了福。有人靠着养殖抚仙湖里的特产鱼类，一千块钱一斤的抗浪鱼发了家，还有人靠星云湖里的特产鱼类大头鱼，开了一家大头鱼酒店，致了富。他们是怎么想到致富点子的？他们又经历了哪些曲折的故事？
小知识：
原产于中国最大高原淡水湖——抚仙湖的抗浪鱼，和大头鲤、金线鱼、大理弓鱼并列为云南四大土著名鱼，尤其抗浪鱼以独特的鱼性、鲜美的风味和古老的“车水捕鱼”而最负盛名。
海镜是全抚仙湖抗浪鱼出产最丰富的村庄，历史上的最高年份，产量甚至可以达到每年几吨以上。抗浪鱼现在每天的全部产量只有几市斤，而且每斤价格昂贵到几百上千元。
星云白鱼是云南省特有珍稀鱼类，产于星云湖，个体小，俗称“真白鱼”，是星云湖的特有鱼类，形似抚仙湖的抗浪鱼，与之称为姐妹鱼，但鲜甜之味胜于抗浪鱼，历来被当地人民视为鱼中之上品。其分布区很狭窄，仅分布于星云湖，就连与星云湖有一天然渠道相通的抚仙湖内也未发现星云白鱼，曾经是星云湖的重要经济鱼类，60年代初，星云湖年产2.5-3万公斤，占鱼产量的6-8%，历史上最高年份的产量占20%，在星云湖中占有重要的地位。
本视频由生财有道官网提供。
DOI:10.16535/j.cnki.dlhyxb.2013.03.018
第28卷第3期2013年6月
大连海洋大学学报
JOURNALOFDALIANOCEANUNIVERSITY
Vol.28No.3June2013
文章编号：2095－1388（2013）03－0298－05
甲砜霉素在松浦镜鲤体内的药物代谢动力学研究
1、211
杨洪波，王荻，卢彤岩
（1.中国水产科学研究院黑龙江水产研究所，黑龙江哈尔滨150070；2.上海海洋大学水产与生命学院，上海201306）
摘要：采用液相色谱与质谱连用技术（LC－MS），研究了以30mg/kg（体质量）的药量在单次口灌给药条
件下，甲砜霉素在松浦镜鲤CynipuscarpioL.体内的药物代谢动力学。试验水温为（20±0.2）℃，试验鲤（1+龄）体质量为（84.84±17.45）g。在给药后0.25、0.50、0.75、1.00、1.50、2.00、4.00、6.00、8.00、12.00、24.00、36.00、48.00、72.00h采集鲤的肌肉、血浆、肝胰脏和肾脏，测定各组织中甲砜霉素的浓度，用药动学3P97软件进行数据分析和处理。结果表明，甲砜霉素在鲤体内吸收分布迅速，符合一级吸收二室开放模型，但消除缓慢。甲砜霉素在鲤血浆、肝胰脏、肾脏和肌肉中的主要药代动力学参数如下：消除半衰期（T1/2β）分别为77.292、24.625、79.966、25.600h；分布半衰期（T1/2α）分别为7.317、0.454、7.409、1.376h；药时曲线下总面积（AUC）分别为782.641μg/（mL·h）、544.756μg/（g·h）、3616.060μg/（g·h）和158.634μg/（g·h）。鉴于甲砜霉素在鲤血浆和肾脏中的消除半衰期长，消除缓慢，建议使用该类药物时应相对延长给药间隔时间。
关键词：鲤；甲砜霉素；药物代谢动力学中图分类号：S948
文献标志码：A
甲砜霉素（Thiamphenicol，简称TAP）目前主要以人工方法合成，是一种有效的广谱抗菌药。其结构与氯霉素非常相似，将氯霉素分子中的对位硝基用甲磺酰基取代即可制成TAP，TAP的抗菌和应用范围与氯霉素基本相同，但毒性有所降低
［1］
生物样品中痕量物质的重要方法之一，具有液相色
谱和质谱两种技术的优点，具有高灵敏度和专一
［9－12］
。本研究中，作性，并且能大大缩短分析时间
者采用LC－MS技术，研究了在单次口灌给药条件
。
氯霉素在水产品中的残留对生物体的健康构成了巨
［2］
大的威胁，且水产动物体内残留的该类药物随食物链能进入人体，诱导人类致病菌对该药产生耐药性，不利于该药对人类疾病的治疗。在水产养殖中，氯霉素类药物还会以原型或代谢物形式经粪便
［3］
等排泄物污染生态环境，威胁公共卫生安全。因此，TAP作为氯霉素的替代药物，在水产疾病
［4］
防控及治疗方面已得到广泛应用。但目前关于TAP在水产动物体内的药代动力学研究较少，国
［5］［6］
外仅见对鲷和鲈有关方面的研究报道，而国内仅见对凡纳滨对虾有关方面的研究报道。
松浦镜鲤CynipuscarpioL.是中国水产科学院黑龙江水产研究所在德国镜鲤选育系F4代基础上培育的新品种，具有背部高而厚、体表基本无鳞、
［8］
体型好、抗寒力强、生长快、繁殖力高等特点。
液相色谱与质谱连用技术（LC－MS）是分析
［7］
下，甲砜霉素在松浦镜鲤体内的药物代谢动力学规
律，旨在为甲砜霉素在水产养殖中的合理用药提供科学依据。
1
1.1
材料与方法
材料
+
松浦镜鲤（1龄）体质量为（84.84±17.45）g，由黑龙江省呼兰冷水性鱼类试验站提供。
TAP标准品（批号01103）含量98.5%，德国DR.Ehrenstorfer产品；TAP原粉（批号P－047－WS11062101）含量98.9%，购自浙江海翔药业股份有限公司；乙酸乙酯、正己烷和甲醇均为色谱纯试剂，MerckKGaA公司产品；其他试剂均为分析纯。
液相色谱－质谱联用仪为ACQuity，美国Wa-ters公司产品。
收稿日期：基金项目：作者简介：通信作者：2012－10－29【松浦镜鲤】
公益性行业（农业）科研专项（201203085）；现代农业产业技术体系建设专项资金资助项目（CARS－46）杨洪波（1987－），女，硕士研究生。E－mail：yanghongbohao@126.com卢彤岩（1967－），女，博士，研究员。E－mail：lutongyan@hotmail.com
第3期1.21.2.1
方法
杨洪波，等：甲砜霉素在松浦镜鲤体内的药物代谢动力学研究299
试验条件及养殖管理试验鱼暂养7d后，
选择规格相近、体质健康的鱼进行试验，给药前停
［13］
饲24h，给药后4h投饵。试验期间水温保持在（20±0.2）℃。试验在方形自动循环水鱼缸中进
溶液稀释至10倍体积，经0.22μm有机相滤膜过滤，供液相色谱－串联质谱测定。
分别称取1g（精确至0.01g）待测的肝胰脏、肾脏和肌肉样品，置于50mL聚丙烯离心管中，加入10mL碱化乙酸乙酯，匀质提取30s，其余处理同上。
1.2.5标准曲线的制备用流动相将TAP标准品配制成0、2、5、10、20、50、100、200ng/mL的标准液，经0.22μm有机相滤膜过滤，对进样瓶中的过滤液进行LC－MS测定。以TAP浓度为横坐标，峰面积为纵坐标绘制标准曲线，求得回归方程和相关系数。
1.2.6相对回收率和精密度取鲤的空白血浆200μL，肝胰脏、肾脏和肌肉各1g，向样品中分别加入浓度为5μg/mL的TAP标准液，至终浓度达到10、20、50、100、200、500ng/mL，混匀静置，使药物充分渗入组织中。按照试验样品处理方法处理后，用液相色谱－串联质谱测定鲤各空白组织中的药物浓度。按照样品处理方法处理后测定各组织中的药物浓度，并按下式计算：
×
100。相对回收率（%）=
实际药物浓度
在1d内分别重复测定上述6个浓度梯度的同一样品3次，在1周内重复测定3次，计算样品在不同浓度梯度下的相对标准偏差，再计算出日内和日间精密度。1.3
数据处理
行，试验期间持续给氧。
1.2.2液相色谱－质谱联用及分析条件
1）色谱条件。DiscoveryC18色谱柱［5μm，150mm×2.1mm（内径）］，流动相为甲醇+水［，流速为0.30φ（甲醇）∶φ（水）=40∶60］
mL/min，柱温为40℃，进样量为20μL［14］。
2）质谱条件。电喷雾离子源，负离子扫描，多反应监测（MRM），电喷雾电压为－1750V；雾化气、气帘气、辅助加热气、碰撞气均为高纯度氮气及其他合适气体，使用前应调节各气体流量以保证质谱灵敏度达到检测要求；辅助气温为500℃，定性离子对质荷比（m/z）为354.0/290.0和354.0/185.0，定量离子对m/z为354.0/185.0，采集时间为200ms，去簇电压为－55V，碰撞能量
［14］
为－18V和－27V。
1.2.3给药方式及样品采集试验用鲤84尾，随机分成14组，每组6尾。以30mg/kg（体质量）
的药量给鲤单次口灌TAP，口灌时将软管插入鱼胃
［15］
部，注意插入的深度，防止将胃部捅破。分别于给药后0.25、0.50、0.75、1.00、1.50、2.00、4.00、6.00、8.00、12.00、24.00、36.00、48.00、72.00h采集鲤的血液，先将注射器用0.3%的肝素钠润洗，然后从试验鱼尾静（动）脉采血，将血液以4000r/min离心10min，分离血浆。采血后将鱼处死，取肾脏、肝胰脏和肌肉样品。采集的所有样品全部放入超低温冰箱（－80℃）中冷冻保存。1.2.4样品的处理
用移液管准确量取200μL待
测血浆样品，置于50mL聚丙烯离心管中，加入10mL碱化乙酸乙酯［φ（乙酸乙酯）∶φ（氨水）=97∶3，下同］，漩涡振荡30s，以4000r/min离心5min，上清转移至鸡心瓶中。在原管中再加入10mL碱化乙酸乙酯，用玻璃棒搅动残渣，于漩涡振荡器上涡旋提取30s，以4000r/min离心5min，上清合并至鸡心瓶中，在45℃下旋转蒸发至干。鸡心瓶残渣用2mL体积分数为10%的甲醇溶液溶解，再加入2mL正己烷旋涡混合30s，以4000r/min离心5min，移取1mL下层溶液于15mL聚丙烯离心管中，用体积分数为10%的甲醇
采用药代动力学3P97软件对试验数据进行处理和模型拟合，计算药物代谢动力学方程和主要药物代谢动力学参数，并确认ATP在鲤体内的药物代谢动力学模型。
2
2.1
结果
色谱行为
TAP标准曲线回归方程为y=61.7879x+405.833（r=0.9988），呈线性关系。在优化的色谱条件下，以m/z354.0作为母离子，选取峰度最强的m/z185.0和m/z290.0作为TAP的监测离子，测得TAP保留时间约为2.64min，在保留时间内没有干扰峰出现，并且色谱峰峰形较佳，均为基线分离峰。2.2
相对回收率和精密度
本试验条件下，鲤血浆、肾脏、肝胰脏和肌肉
84.53%～的相对回收率分别为89.21%～98.18%、
96.34%、96.54%～97.86%和97.68%～99.19%。鲤各组织的回收率为84.53%～99.19%，日内精密度为1.188%±0.354%，日间精密度为3.522%±0.479%，可满足试验要求。2.3
TAP在鲤体内的药代动学参数和药时曲线
3.068e－0.009（t－0.234）－46.504e－2.580（t－0.234）；
－1.525（t－0.143）
+肝胰脏C=84.318e
15.039e－0.028（t－0.143）－109.357e－2.218（t－0.143）；
－0.094（t－0.017）
+肾脏C=111.957e
23.821e－0.09（t－0.017）－135.778e－0.413（t－0.017）；
－0.504（t－0.017）
+肌肉C=26.479e
3.582e－0.027（t－0.017）－30.061e－1.146（t－0.017）。
主要药物代谢动力学参数见表1。在（20±
0.2）℃水温下，以30mg/kg（体质量）的剂量单次给鲤口灌TAP后，药物在鲤血浆、肝胰脏、肾脏和肌肉中的浓度随时间变化的规律见图1。
使用药动学3P97软件进行数据拟合，结果显示：TAP在鲤体内的药动学模型符合一级吸收二室开放模型，各组织的药物代谢动力学方程分别为
－0.095（t－0.234）
+血浆C=43.436e
表1
Tab.1
参数parameter
分布相的零时截距A/（μg·mL－1）或（μg·g－1）分布速率常数α/h－1
消除相的零时截距B/（μg·g－1）或（μg·mL－1）消除速率常数β/h－1药物吸收速率常数Ka/h－1延滞时间TL/h
表观分布容积V·F－1/（L·kg－1）分布半衰期T1/2α/h消除半衰期T1/2β/h吸收半衰期T1/2K/h
a
单次口灌TAP后药物在鲤体内的药代动力学参数
ThepharmacokineticparametersofTAPinSongpucommoncarp
血浆plasma43.4360.0953.0680.0092.5800.2340.6687.31777.2920.2690.0150.0570.032782.6410.0381.36139.825
肝胰脏hepatopancreas
84.3181.52515.0390.0282.2180.1430.7280.45424.6250.3120.5680.0760.910544.7560.0550.75722.764
肾脏kidney111.9570.09423.8210.0090.4130.0170.2737.40979.9661.6790.0270.0300.0453616.0600.0085.14375.742
肌肉muscle26.4790.5043.5820.0271.1460.0171.6361.37625.6000.6050.1180.1160.297158.6340.1891.42310.
491
药物自周边室到中央室的一级转运速率K21/h－1药物自中央室的消除速率K10/h－1
药物自中央室到周边室的一级转运速率K12/h－1
药时曲线下总面积AUC/（μg·mL－1·h－1）或（μg·g－1·h－1）体积内总消除率CL/（L·kg－1·h－1）达峰时间Tpeak/h
峰浓度Cmax/（μg·g－1）或（μg·mL－1）
3讨论
TAP在鲤体内的药物动力学试验结果表明，
在（20±0.2）℃的水温条件下，以30mg/kg（体质量）的剂量单次给鲤口灌TAP，血药浓度用一级吸收二室开放模型描述最为合适。杨先乐等以50mg/kg剂量的氯霉素对1龄和2龄尼罗罗非鱼Tilapianilotica进行单次口灌给药；李爱华［17］在水温（20±2）℃下，以100mg/kg剂量的氯霉素对
图1
TAP在鲤血浆、肾脏、肝胰脏和肌肉中的药物浓度ConcentrationsofTAPinplasma，hepatopan-creas，kidneyandmuscleofSongpucommoncarp
Fig.1
［16］
草鱼和复合四倍体异育银鲫Carassiusauratusgibelio
［18］
进行单次腹腔注射；陈玲珍等在水温17℃下，分别以5.0、10.0、20.0mg/kg剂量的氟苯尼考对中华绒螯蟹Eriocheirsinensis进行单次肌肉注射给
重分析其差异。
/thumb.jpg)
［19］
药；林茂等以30mg/kg剂量的氟苯尼考对日本鳗鲡AnguillajaponicaTemmincketSchlegel和欧
洲鳗鲡Anguillaanguilla进行混饲口灌给药。由上述文献可知，在不同剂量、温度、给药方式和发育阶段等条件下，氯霉素类药物在水产动物体内的药代动力学多数适合用二室模型来描述。
达峰时间（Tpeak）和药物的峰浓度（Cmax）是衡量药物在机体内的吸收速度和程度的重要参数，药时曲线下总面积（AUC）用于衡量药物在机体内的吸收及血浆和各组织器官对药物的吸收程度。本研究结果表明，TAP进入鲤体内后迅速扩散，鲤血浆中的Tpeak为1.361h，肝胰脏、肾脏和肌肉的Tpeak为0.757、5.743、1.423h，TAP在鲤肾脏中的达峰时间最长。AUC在鲤血浆、肝胰脏、肾脏和肌肉中分别为782.641μg/（mL·h）、544.756μg/（g·h）、3616.060μg/（g·h）和158.634μg/（g·h），这表明TAP在鲤肾脏中的吸收量明显高于血浆、肝胰脏和肌肉，TAP在渗透性好、血管丰富的组织（如肾脏）中吸收量较多。由此推测，血浆、肌肉、肝胰脏和肾脏中的TAP分布量可能与血流量有关，两者具有动态同步性。
本试验中，血浆、肝胰脏、肾脏、肌肉中的T1/2Ka分别为0.269、0.312、1.679、0.605h，表明TAP在鲤体内吸收迅速，不同部位的吸收速率
［21］
不同可能是由血液循环速度差异引起的。给鲤单次口灌TAP后，T1/2β从大到小依次为肾脏（79.966h）、血浆（77.292h）、肌肉（25.600h）和肝胰脏（24.625h），表明TAP在血浆和肾脏中的消除半衰期较长，可能是因为TAP在血浆中吸收，经肾脏排泄所致，而肝胰脏和肌肉中的消除半衰期相似，消除半衰期相对较短。本研究结果显示，TAP在松浦镜鲤体内消除缓慢，平均滞留时间较长。由以上药代动力学参数可知，TAP在鲤体内分布快，吸收迅速，且吸收效果较好，但在肾脏和血浆中消除较缓慢。鲤各组织中K21均小于K12，比值均大于1，说明从周边室到中央室的分布速率小于从中央室到周边室的分布速率。【松浦镜鲤】
综上可以看出，TAP在松浦镜鲤体内吸收快且完全，达峰时间短，分布较广泛，这与其他氯霉素类药物的特征十分相似，但血浆和肾脏中的消除半衰期长，消除缓慢，因此，在使用该类药物时，
［22－27］
、应相对延长给药间隔时间。但是，由于种属性别量
［23，28］
31］
、水温［29－30］、给药方式［24，和给药剂
［20］
参考文献：
［1］李俊锁，邱月明，王超．兽药残留分析［M］．上海：上海科学技
2002．术出版社，
［2］蒋定国，杨大进．动物性食品中氯霉素残留检测技术的研究概
J］．中国食品卫生杂志，2002，14（2）：44－47．况［
［3］WuYB，WangZS，LiaoXT，etal．Effectsofenroflixacinonmi-croorganismsinwetlands［J］．ActaEcologicaSinica，2006，26（8）：2640－2645．
［4］郝凯，过世东，胥传来．水产品中甲砜霉素残留的ELISA检测
J］．食品工业科技，2006（2）：186－189．方法研究［
［5］CastellsG，IntorreL，BertiniS，etal．Oralsingle－dosepharmacoki-neticsofthiamphenicolinthesea－bass（Dicentrarchuslabrax）［J］．JournalofVeterinaryPharmacologyandTherapeutics，2000，23（1）：53－54．
［6］DellaRoccaG，AnfossiP，TomasiL，etal．In－feedadministration
ofthiamphenicolinsea－bream（Sparusaurata（Pagrusaurata））tissuedistributionandresidues［J］．JournalofVeterinaryPharma-1997，20（11）：316－317．cologyandTherapeutics，
［7］陈玉露．甲砜霉素和氟甲砜霉素在凡纳滨对虾体内的药代动
D］．雅安：四川农业大学，2009．力学和对药敏影响的研究［
［8］王洋，徐奇友，许红，等．维生素K3对松浦镜鲤体成分、肉质和
2011，23（6）：1058－抗氧化能力的影响［J］．动物营养学报，1064．
［9］FuI，WoolfEJ，MatuszewSkiBK．Effectofthesamplematrixon
thedeterminationofindinavirinhumanurinebyHPLCwithturbo-ionspraytandemmassspectrometricdetection［J］．PharmBiomedAnal，1998，18（3）：347．
［10］MatuszewSkiBK，ConstanzerML，ChavezengCM．Matrixeffect
inquantitativeLC/MS/MSanalysesofbiologicalfluidsamethodfordeterminationoffinasterideinhumanplasmaatpicogramperJ］．AnalChem，1998，70（5）：882－889．milliliterconcentrations［
［11］SutherlandFC，DeJagerAD，SwartKJ，etal．Determinationof
linsidomineinhumanplasmabytandemLC－MSwithESI［J］．PharmBiomedAnal，2000，22（3）：461－467．
［12］ItoS，TsukadaK．Matrixeffectandcorrectionbystandardaddi-tioninquantitativeliquidchromatographic－massspectrometrica-nalysisofdiarrheticshellfishpoisoningtoxins［J］．ChromatogrA，2002，943（1）：39－46．
［13］王贤玉，宋洁，王伟利，等．氧氟沙星在吉富罗非鱼体内的药
J］．大连海洋大学学报，2011，26（2）：代动力学及残留的研究［144－148．
［14］庞国芳．林海丹．林峰，等．可食动物肌肉、肝脏和水产品中氯
——液相色谱－串联霉素、甲砜霉素和氟苯尼考残留量的测定—S］．北京：中国标准出版社，2007．质谱法［
［15］郭娇娇，潘红艳，杨虎，等．恩诺沙星在杂交鲟体内的药物代
J］．大连海洋大学学报，2011，26（4：）362－366．谢动力学［
［16］杨先乐，湛嘉，胡鲲．氯霉素在尼罗罗非鱼血浆中的药代动力
J］．水产学报，2005，29（1）：60－65．学研究［
［17］李爱华．氯霉素在草鱼和复合四倍体异育银鲫体内的比较药
J］．中国兽医学报，1998，18（4）：372－374．代动力学［
等复杂原因造成水产动物之间药动学特征
存在显著差异，因此，确定合理的给药方案时需慎
［32－33］
302大连海洋大学学报
seawaterat11℃［J］．Aquacult，1993，112（1）：1－11．
第28卷
［18］陈玲珍，杨洪生，吴光红，等．给药剂量对氟苯尼考在中华绒
2010，45（4）：螯蟹体内的药代动力学影响［J］．动物学杂志，102－109．
［19］林茂，纪荣兴，陈政强，等．氟苯尼考在日本鳗鲡和欧洲鳗鲡
．安徽农业科学，2011，39（36）：22341－体内的药代动力学［J］22517．22343，
［20］AviseJC．PhylogeographytheHistoryandFormationofSpecies
［M］．Cambridge，MassachusettsLondon，England：HarvardUniver-sityPress，2000．
［21］邓树海，．天张秀珍，邹立家．药物动力学与生物药剂学［M］
1992：436－479．津：天津科技翻译出版公司，
［22］FengJB，JiaXP，LiLD．Tissuedistributionandeliminationof
florfenicolintilapia（Oreochromisniloticus×O．aureus）afterasin-gleoraladministrationinfreshwaterandseawaterat28℃［J］．Aquacult，2008，276：29－35．
［23］ParkBK，LimJH，KimMS，etal．Pharmacokineticsofflorfeni-colanditsmetabolite，florfenicolamine，intheKoreancatfish（Si-lurusasotus）［J］．VetPharmacolTher，2006，29：37－40．［24］YanongRPE，CurisEW．Pharmacokineticstudiesofflorfenicol
inkoicarpandthreepotgouramiTrichogastertrichopterusafteroral．JAquaticAnimalHealth，2005，andintramusculartreatment［J］17（2）：129－137．
［25］MartinsenB，HorsbergTE，VarmaKJ，etal．Singledosepharma-cokineticstudyofflorfenicolinAtlanticsalmon（Salmosalar）in
［26］LimJH，KimMS，HwangYH，etal．Plasmaandtissuedepletion
offlorfenicolinoliveflounder（Paralichthysolivaceus）afteroralJ］．Aquacult，2010，307：71－74．administration［
［27］SamuelsenOB，BerghO，ErvikA．Pharmacokineticsofflorfenicol
incodGadusmorhuaandinvitroantibacterialactivityagainstVib-rioanguillarum［J］．DisAquatOrgan，2003，56：127－133．［28］TangJ，YangXL，ZhengZL，etal．Pharmacokineticsandtheac-tivemetaboliteofenrofloxacininChinesemitten－handedcrab（Eri-ocheirsinensis）［J］．Aquacult，2006，260：69－76．
［29］刘永涛，艾晓辉，杨红．不同水温下甲砜霉素在斑点叉尾鮰体
2009，33（1）：1－6．内的药代动力学研究［J］．水生生物学报，
［30］艾晓辉，刘长征，周运涛．不同水温和给药方式下磺胺甲恶唑
．水生生物学报，2005，29（2）：在草鱼体内的药动学研究［J］210－214．
［31］陈菊芳，周孝治，聂湘平，等．不同给药方式下环丙沙星在模
J］．生态学报，2007，27（12）：5307．拟水生态系统中的归趋［
［32］刘海侠，刘晓强，张振龙，等．氟苯尼考单剂量腹腔注射和灌
2011，20服后在鲫鱼体内的药代动力学［J］．西北农业学报，（5）：54－58．
［33］岳刚毅，吴志新，杨倩，等．氟苯尼考及氟苯尼考胺在克氏原
2011，35（2）：螯虾体内的药物代谢动力学［J］．水生生物学报，307－312．
PharmacokineticsofthiamphenicolinSongpu
commoncarpCyprinuscarpioL．
YANGHong-bo1，2，WANGDi1，LUTong-yan1
（1．HeilongjiangRiverFisheriesResearchInstitute，ChineseAcademyofFisherySciences，Harbin150070，China；2．CollegeofFisheriesand
LifeScience，ShanghaiOceanUniversity，Shanghai201306，China）
Abstract：Thepharmacokineticsofthiamphenicol（TAP）wasstudiedin1+yearoldSongpucommoncarpCyprinuscarpioL．administratedorally，withbodyweightof（84．84±17．45）g，byliquidchromatography－massspectro-graphy（LC－MS）at30mg/kg（bodyweight）atwatertemperatureof（20±0．2）℃．Thedrugconcentrationsinplasma，hepatopancreas，kidneyandmuscleweremonitored0.25，0.50，0.75，1.00，1.50，2.00，4.00，6.00，8.00，12.00，24.00，36.00，48.00，and72.00hafterdrugadministration，andanalyzedby3P97software．Theth-iamphenicolabsorptionwasfoundasatwo－compartmentopenmodelwith1storderabsorptioninplasma，hepato-pancreas，kidneyandmuscle，withT1/2αof7．317hinplasma，0．454hinhepatopancreas，7．409hinkidneyand24．625hinhepatopancreas，79．966hinkidneyand25．1．376hinmuscle，andT1/2βof77．292hinplasma，
600hinmuscle．TheAUCwasfoundtobe782．641μg/（mL·h）inplasma，544．756μg/（g·h）inhepatopan-creas，3616．060μg/（g·h）inkidneyand158．634μg/（g·h）inmuscle．ThefindingsrevealthatthedrugissuggestedtobeadministratedatalongintervaleverydeliverytimeduetolongperiodofTAPtoxinandslowelimi-nationinplasmaandkidney．
Keywords：CyprinuscarpioL．；thiamphenicol；pharmacokinetics
36（4）：841－847江西农业大学学报2014，
ActaAgriculturaeUniversitatisJiangxiensis
http：//xuebao．jxau．edu．cnDOI：10．13836/j．jjau．2014136
J］．江西农业大学学报，2014，36（4）：841－847．杨洪波，王荻，卢彤岩．甲砜霉素对松浦镜鲤血细胞及血清生化指标的影响［
甲砜霉素对松浦镜鲤血细胞及
血清生化指标的影响
1，2
杨洪波，王
11*
荻，卢彤岩
（1．中国水科学研究院黑龙江水产研究所，黑龙江哈尔滨150070；2．上海海洋大学水产与生命学院，上海201306）
摘要：本文选用我国淡水养殖主要品种的鲤科鱼类作为实验动物，采用口灌方法，研究甲砜霉素不同给药剂量旨在为TAP在鲤养殖过程中的合理、规范用药提供科学理论依据。选取1倍正对松浦镜鲤脾脏的毒性作用，
3倍中等剂量和5倍毒性剂量对松浦镜鲤进行甲砜霉素口灌给药，常剂量、并将给药时期设为最大推荐使用期限5d的3倍，即连续给药15d，并设口灌蒸馏水对照组。停药24h后采集实验鱼血液样品，一部分血液用于血细胞，另一部分收集血清，对血清中15项指标进行测定。结果显示，与对照组相比，随着给药浓度的增加，实且3倍剂量和5倍剂量给药组血细胞数量均低于对照组。随着给药浓验鱼血细胞数量呈先升高后降低趋势，
度的增加，实验组红细胞微核率和核异常率也相应增加，且红细胞核异常率变化幅度较大。各实验组总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、血糖（GLU）、氯化物（Cl）、钠（Na）、钾（K）、总胆红素（TBIL）、碱性磷酸酶（AKP）、肌酐（Scr）、谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、总胆固醇（TCH）均有显著差异；由此可见，高剂量甲砜霉素严重影响鱼类血液功能及正常的生理生化内环境，部分生化指标指示其对鲤肝脏和肾脏正常生理功能造成了一定从而危害鱼类健康。因而，在养殖过程中进行病害防治时，应严格按照TAP的科学用药规程，谨防过的压力，
度用药和延长用药疗程，以免对鱼体造成损伤。关键词：甲砜霉素；松浦镜鲤；血细胞；血清生化指标中图分类号：S948
文献标志码：A
文章编号：1000－2286（2014）04－0841－07
EffectofThiamphenicolonBloodcellNumberand
ＲedBloodNucleiinSongpuMirrorCarp【松浦镜鲤】
2
YANGHong-bo1，，WANGDi1，LUTong-yan1*
（1．HeilongjiangＲiverFisheriesＲesearchInstitute，ChineseAcademyofFisherySciences，Harbin150070，China；2．CollegeofFisheriesandLifeScience，ShanghaiOceanUniversity，Shanghai201306，China）
Abstract：Thisselectionofthemainspeciesoffreshwaterfarmedcarpfishasexperimentalanimals，theuseoforalirrigationmethodstostudythetoxiceffectsofdifferentdosesofthiamphenicolonMatsuuramirrorcarpspleen，designedtoTAPreasonableincarpbreedingprocessstandardizemedicationprovidesscientifictheory．Thetrialwasconductedinsongpumirrorcarpwithdifferentdosesoforalthiamphenicolof0，50，150and250mg/kg，respectivelyfor15days．Thebloodsamplesofsongpumirrorcarpweretaken24haftertheo-ralmedication．Partofthebloodwasforobservationofbloodcells，therestwasforcollectionofserum．Thefif-teenindicatorsofserumweredetermined．Theresultsshowedthatthebloodcellnumbersinthegroupsof150
收稿日期：2013－11－24
修回日期：2014－02－09
基金项目：农业部公益性行业（农业）科研专项经费（201203085）和现代农业产业技术体系建设专项资金（CAＲS－46）E－mail：yanghongbohao@126．com；*通信作者：卢作者简介：杨洪波（1987—），女，硕士生，主要从事鱼类病害研究，
E－mail：lutongyan@hotmail．com。研究员，博士，彤岩，
·842·
江西农业大学学报
第35卷
and250mg/kgweresmallerthanthatofthecontrolgroup．Withtheincreaseofdrugdose，thebloodcellnum-bersfirstlyincreasedandthendecreased．Inaddition，thenucleiabnormalrateanddyskaryosisinerythrocytesrosewiththeincreaseofdrugdose．Thenucleiabnormalratechangedalot．Theresultsshowedthattotalpro-albumin（ALB），glucose（GLU），chloride（Cl），sodium（Na），potassium（K），calcium（Ca），tein（TP），
phosphorus（P），totalbilirubin（TBIL），alkalinephosphatase（AKP），creatinine（Scr），alanineaminotrans-ferase（ALT），aspartateaminotransferase（AST），totalcholesterol（TCH）ofexperimentalgroupweresignifi-cantdifferences．Soitcanbesummarizedthathighdoseofthiamphenicolaffectedfunctionofnormalbloodandandsomebiochemicalindicatorsindicatethatitcouldcauseacer-physiologicalandbiochemicalenvironment，
taindegreeofpressureonthenormalphysiologicalfunctionoftheliverandkidneyinsongpumirrorcarp，im-inthediseasecontrolperiod，TAPshouldbestrictlyusedinaccordancewithpairingthehealthoffish．Thus，
therulesofscientificmedication．Over－medicationandprolongeddrugtreatmentshouldbeavoided，soasnottocausedamagetothefish．
Keywords：thiamphenicol；songpumirrorcarp；bloodcell；theserumbiochemicalindicators
甲砜霉素（thiamphenicol，简称TAP）对链球菌属，双球菌属，棒状杆菌属的细菌以及鱼类的大多数病原菌如鳗弧菌、嗜水气单胞菌、点状气单胞菌和荧光假单胞菌等具有良好的抗菌作用。其抗菌作用、
［2－3］
，抗菌机理与氯霉素基本相似但由于它在血液中很少与蛋白质结合，也不被肝脏破坏，在尿和胆汁
［1］
TAP是氯霉素类第二代广谱抗菌而且是长效性药物，因此体内抗菌作用比氯霉素好，内较氯霉素高，
－－［1］
药，是由wintherop研究所的eulter等用甲磺酞基（CH3SO2）置换了氯霉素的硝基NO3而合成的。
［4］它也对一些耐氯霉素的细菌具有抗菌性。由于氯霉素的残留对水生生物的健康构成了巨大的威胁，同时残留在水产动物体内的该类药物会随食物链进入人体，对人体造成损伤的同时也将诱导人类致病菌产生耐药性，不利于该药在人类疾病治疗中的应用；同时水产养殖中部分药物会以原型或代谢物形式
［5－7］
。欧盟、经粪便等排泄物进入环境，污染生态环境和威胁公共卫生安全美国、日本和香港等国家和
我国农业部也于2000年将其从《中国兽药典》中删除，此药物重地区已经下令禁止生产和进口氯霉素，
《动物性食品兽药残留规定》新进入安全评价体系，在中规定可食用动物的可食部分不得检出，并且在
日常检测中，将其列为必检项目，一旦发现，一律禁止出口。而其第三代产品氟甲砜霉素（氟苯尼考）虽
［8－10］
，然抗菌效果好也尚未发现对动物和人有不良反应，但其价格较高，多用于对虾和鳗鱼等经济价值
较高的养殖品种，难以广泛应用于水产动物养殖生产。TAP由于具有抗菌效果好和物美价廉的优点，作
［11］
为氯霉素的替代药物在水产疾病防控方面有广泛应用。TAP对鲤鱼血细胞数量及特性的影响仅见
［12］
——松浦镜鲤（Songpumirrorcarp）血唐海蓉等2003年的报道，目前未见该药对我国新特优鲤鱼品种—
液相关特性影响的研究。本研究拟通过对TAP不同给药浓度对松浦镜鲤血细胞数及红细胞核的影响进行计数分析，为指导TAP在松浦镜鲤病害防控过程中的科学使用奠定理论基础，并为该药在水产养殖中的应用提供大量科学数据。
1材料和方法
1．1试验材料
1．1．1试验动物试验用松浦镜鲤，体质量（82．30±13．59）g，购自黑龙江省呼兰冷水性鱼类试验站。试验鱼在鱼缸中以全价基础饲料暂养7天后，随机选取规格相近、体质健康者进行试验，给药前停饲24h。试验在方形自动循环水族缸（110cm×55cm×55cm）中进行，试验期间持续循环、过滤、给氧，水温保持在（20±0．2）℃，保持溶氧浓度大于6．00mg/L。1．1．2药品与仪器TAP原粉：含量98．9%，批号P－047－WS11062101，购自浙江海翔药业股份有限公司。无水乙醇、氯化钠、氯化钙、氯化钾、甲醇、瑞士染料、姬姆氏粉、丙三醇等试剂均为分析纯。血清钠、白蛋白、总胆红素等测定试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。试验仪器采用LEICADM4000B显微镜等。
1．1．3试验试剂红细胞稀释液：配方引自文献［13］。
2mL冰醋酸，3滴1%亚甲基蓝。白细胞稀释液：98mL蒸馏水，
瑞氏染液：瑞氏染料1g及500mL甲醇，将瑞氏染料加于研钵中加入少许甲醇研磨，溶于甲醇后的
第4期杨洪波等：甲砜霉素对松浦镜鲤血细胞及血清生化指标的影响·843·
染料取出过滤，加塞密闭放置。
吉姆萨氏染液：吉姆萨氏粉0．5g，纯甘油33mL，纯甲醇33mL，染料置于研钵中，加入甘油充分研磨，加入其余甘油，水域加温1～2h，经常用玻璃棒搅拌，最后加入甲醇混合，装棕色瓶保存一周后过滤即成原液。临用
即成应用液。时取原液加入pH6．8的缓冲液稀释10倍，
pH6．8的缓冲液：1%磷酸二氢钠30mL，1%磷酸氢
图1甲砜霉素的结构式
二钠30mL，加蒸馏水1000mL。
Fig．1Thiamphenicolstructuralformula
1．2试验方法
1．2．1给药方案及样品采集试验设3个试验组和1个对照组，均设3个平行，每个平行试验鱼30
［14］［15］
1倍正尾。试验方案设定参考中华人民共和国药典和新编渔药手册，选取1个非给药的对照组，
常用药推荐剂量，和3倍中等剂量及5倍毒性剂量，并将给药时期设为最大推荐使用期限5d的3倍，
50、150、250mg/kg体质量给药量连续口灌给药15d，即0、每天1次，于停药24h后自试验鱼尾静（动）脉采集血液样品，一部分用于血细胞的观察，一部分分离血液4000r/min离心10min，收集血清，进行
保存于－80℃冰箱中。血清生化指标测定，
1．2．2血细胞计数及红细胞核观察红细胞计数：抽取0．4mL实验鱼全血与0．1mL质量浓度3%的肝素钠混匀，制成抗凝血，然后用红细胞稀释液稀释后，在显微镜下用血球计数板对样品中的红细胞进
［16］
行计数，在血球计数板上计数。
白细胞计数：抗凝血用白细胞稀释液稀释后，在显微镜下用血球计数板计数白细胞数，在血球计数
［16］
板上计数。
［17］
红细胞微核和异常观察：抗凝血制备血涂片，设3个平行，血涂片自然晾干后，参照叶应妩等报道的方法进行染色。瑞氏染液染色40～50s，蒸馏水轻轻冲洗，吉姆吉姆萨氏染液复染10min，流水冲洗，干燥后镜检。用100倍油镜观察血涂片，每张血涂片统计1000个红细胞，记录其微核和异常的红细胞，以百分率表示微核率和异常率。
微核率=微核红细胞数/计数红细胞数（1000）×100%核异常率=核异常红细胞/计数红细胞数（1000）×100%
TP）、ALB）、血清生化指标的肠测定：实验测定血清中总蛋白（totalprotein，白蛋白（albumin，血糖（blood
sugar，GLU）、Cl）、Na）、K）、Ca）、氯化物（chloridum，钠（sodium，钾（potassium，钙（calcium，磷（phosphor，P）、TBIL）、AKP）、总胆红素（totalbilirunbin，碱性磷酸酶（alkalinephosphatase，肌酐（serumcreatinine，Scr）、ALT）、谷丙转氨酶（glutamic－pyruvictransaminase，谷草转氨酶（glutamicoxalacetictransaminase，AST）、UN）、TCH）15项指标，尿素氮（ureanitrogen，总胆固醇（totalcholesterol，测定采用试剂盒法。
2
2．1
结果与分析
红细胞计数结果
口灌不同浓度TAP后松浦镜鲤的红细胞计数结果见图2。结果表明，与对照组相比，随着给药
1倍给药组略高，3倍和5倍给药组显著降低，5倍给红细胞数量呈先升高后降低趋势，剂量的增加，
药组数量最低；且5倍给药组显著低于1倍给药组和3倍给药组。2．2白细胞计数结果
TAP对松浦镜鲤白细胞细胞口灌不同浓度TAP后松浦镜鲤的白细胞数量变化见图3。由图可知，
1倍给药组略高，3倍和5倍给药组略低；5倍给药组显著低于数量产生了一定的影响，与对照组相比，
1倍给药组和3倍给药组。2．3红细胞微核率
口灌不同浓度TAP后松浦镜鲤的红细胞微核率观察结果如图4所示，红细胞微核的形态如图6所示。由图4可见，对照组红细胞微核率为0，而随着口灌TAP浓度的增加，松浦镜鲤红细胞微核率也相
1倍给药剂量组红细胞微核率为0．033%；3倍给药剂量组红细胞微核率上升为0．1%，应的增大，显著
高于对照组和1倍给药剂量组；而5倍给药剂量组红细胞微核率为0．517%，极显著高于对照组和1倍给药剂量组。在50mg/kg体质量给药组时红细胞微核率升高较少，而在250mg/kg体质量给药组时红细胞微核率陡然升高。
·844·
江西农业大学学报
第35
卷
A、B用来表示极显著性差异，a、b表示显著性差异。
A，Bsaidverysignificantdifference，a，brepresentedsignificantdifference．
图2红细胞数量变化
Fig．2Variationofredbloodcell
numberA、B用来表示极显著性差异，a、b表示显著性差异。
A，Bsaidverysignificantdifference，a，brepresentedsignificantdifference．
图3白细胞数量变化
Fig．3Variationofwhitebloodcell
number
A、B用来表示极显著性差异，a、b、c表示显著性差异。
A，Bsaidverysignificantdifference，a，b，c
representedsignificantdifference．
图4红细胞微核率
Fig．4Micronucleusrateofredblood
cellA、B用来表示极显著性差异，a、b、c表示显著性差异。
A，Bsaidverysignificantdifference，a，b，c
representedsignificantdifference．
图5红细胞核异常率
Fig．5Abnormalrateofredbloodcellnuclei
2．4红细胞核异常率
口灌不同浓度TAP后松浦镜鲤的红细胞
核异常率观察结果及红细胞核异常形态分别如图5和图6所示。对照组红细胞核异常率为0，而随着口灌TAP浓度的增加，松浦镜鲤红细1倍给药剂量组红细胞核异常率也相应的增大，
胞核异常率为0．12%；3倍给药剂量组红细胞核异常率上升为1%；5倍给药剂量组红细胞核异
达到了1．155%。1倍给药剂量常率略有升高，
组红细胞核异常率显著高于对照组，而3倍和5倍给药剂量组显著高于对照组和1倍给药组。2．5血清生化指标测定
血清生化指标测定结果如表1所示。与对
ALB、Cl、K、TBIL、各实验组TP、照组相比，
AKP、ALT、AST、GLU、Na、Scr、TCH均具有显著
3倍给药组Ca显著升高，P无显著性性差异，
1倍和3倍给药组的UN显著降低；与1差异，
TP、ALB、Cl、K、AKP、ALT、AST、倍给药组相比，
gLU、Na、UN具有显著性差异，3倍给药组Ca
A为细胞核异常的红细胞；
B为红细胞微核的形态；C为正常形态的红细胞。Inpicture，Arepresentedabnormalnucleiofredbloodcell；
Brepresentedmicronucleusformofredbloodcell；Crepresentednormalshapeofredbloodcell．图6红细胞微核和核异常形态（10×100）Fig．6Morphologyofdyskaryosisinerythrocytes
andabnormalnuclei
第4期杨洪波等：甲砜霉素对松浦镜鲤血细胞及血清生化指标的影响·845·
5倍给药组的TBIL、Scr、TCH显著升高。具有显著差异，
表1
Tab．1
指标IndicatorsTP（g·L－1）ALB（g·L－1）GLU（mmol·L－1）Cl（mmol·L－1）Na（mmol·L－1）Ca（mmol·L－1）K（mmol·L－1）P（mmol·L－1）TBIL（mg·dL－1）AKP（U·gprot－1）Scr（μmol·L－1）ALT（U·L－1）AST（U·L－1）UN（mol·L－1）TCH（mmol·L－1）
血清中各项指标的测定结果
Themeasuredresultsoftheindicatorsinserum
1倍给药组1－folddosagegroup31．38±4．38b11．86±1．09b4．94±0．30a78．73±4．39ab37．24±4．71ab1．84±0．20a0．20±0．12a2．93±0．17a0．36±0．24a26．53±4．41a13．75±2．12a2．23±0．32ab28．89±0．22ab1．65±0．08a1．14±0．48a
3倍给药组3－folddosagegroup23．43±2．23a10．43±1．84c3．27±0．42a78．19±3．48a36．88±6．21a2．17±0．10b0．75±0．23a2．45±0．28a0．38±0．09a21．55±5．39a13．75±2．82a2．71±0．53b33．82±0．27b1．78±0．19a1．14±0．59a
5倍给药组5－folddosagegroup
20．14±1．80ab7．71±1．14c3．40±0．95a76．35±4．68a36．66±7．56a1．82±0．16a0．056±0．03a3．50±0．24a0．49±1．08b16．4±6．97a16．72±3．03a4．93±0．16c40．85±0．38c2．16±0．24a1．49±0．31a
对照组Thecontrolgroup22．32±1．76ab12．92±0．97ab5．11±0．16a85．73±6．12b38．17±4．38b1．75±0．10a0．46±0．14a3．56±0．36a0．20±0．06a24．50±2．52a20．90±5．75a1．22±0．28a27．03±0．20a2．12±0．08a4．16±0．55a
s检验，n=5。同行数据后不同小写字母表示差异显著（P＜0．05）。使用Docan’
UseDocan’stest，n=5．Afterthepeerdatafromdifferentlowercaselettersindicatesignificantdifference（P＜0．05）．
3讨论
血液是动物体内极其重要的一种组织，鱼类血液指标常被用来评价鱼类的健康、营养及环境适应状
［18－20］
是重要的病理、生理和毒理指标况，数
［21］
。红细胞是血液中数量最多的血细胞，鱼类的血红细胞在其呼
吸和生理方面具有重要作用，不同营养、健康状况以及环境因子均可不同程度地影响鱼类血红细胞
。当鱼体内红细胞数量发生变化时会导致氧气输送功能发生相应的变化；本实验发现口灌50mg/kgTAP时，与对照组相双比红细胞数量略有升高，可能是鱼体受到药物刺激，耗氧率增大，从而推测可能是药物对鱼诱导鱼体产生更多的红细胞用于运送氧气造成的。3倍和5倍给药组显著降低，
［22］
体相关组织功能造成压力，影响了鱼体维持正常的血红细胞数量，唐海蓉等实验也发现高剂量长时这与本实验结果相一致。间使用TAP会导致肉仔鸡红细胞数量显著降低，
白细胞俗称白血球，是血液中非常重要的一类血细胞，也是机体防御系统的一个重要组成部分。它具有吞噬异物并产生抗体的作用，机体伤病的损伤治愈能力，抗御病原体入侵的能力，对疾病的免疫抵
在1倍给药组显著升高，而在3倍和5倍给药组中数量降低。可能在1倍给药抗力等。实验结果表明，
组情况下，由于异物进入机体，刺激机体产生免疫反应，从而导致鱼血液白细胞数量增多，崔素丽在研究而发生应激反应时，白细胞数量会增加中指出当机体受到外界因子刺激，
［23］
，而随着的给药剂量的而增
加白细胞数量减少，可能是由于TAP对松浦镜鲤的肾和脾等造血器官造成损伤，引起松浦镜鲤造血功
能抑制而导致的。
微核是生物在环境中受到诱变导致细胞核受到损伤而产生的一种现象。鱼类红细胞与人类红细胞最大的差别就是具有细胞核丹
［26］
［24］
。红细胞微核及核异常是一种简便、快速、有效的检测动物受到化学毒
［25］
物损害程度的方法，关于药物对水产动物血液红细胞微核及核异常具有诱变作用谢志浩、叶继
［27］
、卢彤岩都曾有报道。实验发现TAP可诱导提高微核率和核异常率，并随着给药浓度的升高，
微核率和核异常率也呈明显升高趋势。从而可知，高剂量TAP对松浦镜鲤机体造成了损伤，并可能引起红细胞凋亡或功能丧失，进而严重影响鱼类血液功能及正常的生理生化内环境，危害鱼类健康，降低
上一篇：养鳖大概需要多少投资
下一篇：我爱发明自动电烧烤机