罗汉果的组织培养

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篇一 罗汉果的组织培养
罗汉果种植技术

  　　一、罗汉果果园的建立   　　 1、园地的选择： 新开辟果园要根据罗汉果生物学特性所具备的条件，选择于海拔300～500米、土壤为黄红壤土、肥沃、土层厚、四周保存有良好的杂木及次生林的坡地建园。冬季和夏季冷热空气容易积沉，通风排水不好的山谷和岭槽地不宜选用。   　　2、园地的开垦：　修园时一般在8～9月间，抢晴天修地，9～10月放火烧地。因为这时正值高温季节，多晴天，柴草易干，容易把地烧好，烧尽柴草树叶，消灭地上病虫害，风化土壤，10月以后便可挖地。经过一个冬季的暴晒风化，可以加速土壤熟化，改良土壤理化性质，提高土壤肥力。开垦时一般深翻8寸左右，清除树根，挖掉树蔸，除尽草根及石头，第二年种植前再松土一次便可种植。   　　种植罗汉果在建园的时候，必须考虑园地水源。如果水源较远，应在园地边建一个蓄水池，方便施肥和抗旱用水。园地坡度小、排水不良，要开好哇沟、环地沟排水，创造适宜罗汉果栽培生长的土壤条件。   　　二、罗汉果种植技术   　　 1、种植和开蔸时间：　新园地种植和宿根地开蔸的时间一般于清明前后一星期左右，种植组培苗的可推迟到谷雨种完。   　　2、种植前认真选好种（茹芽头完好、根须多、种茹嫩、无病虫的健壮种茹），备好猪牛粪做基肥。种植时先按5×6尺的株行距，开穴，每亩160～200穴左右，每穴施3～4斤优质猪牛粪与土拌匀，再把种茹斜种于上面，芽头朝上，用细泥复盖2～3分厚，避免太阳晒芽头，种植宜多种双株，少种单株，每亩种植300～360株，如果是宿根地开蔸时结合清理病茹、虫茹、僵茹、补足缺蔸，保证全苗。   　　3、老茹的处理方法：　罗汉果种茹一般种植4年后，由于茹根生长多年，根毛老化，在开蔸时要割除部分根系或者平茹块一寸左右割完全部根系；如果是7年以上的老茹，开蔸时除割根外，对茹块老皮层，全部用刀括除，然后再植，利于吸收温度，促进长根萌芽。加强管护，可以延长结果年限，增加产量。    　　4、组培苗的种植：　种植规格及每亩株数与上同，但在种植时选优良株系，经过脱毒的无病苗并经过炼苗，根系发育好而须根多的壮苗进行种植，种时把根系自然伸展，用细土回填、压紧、淋足定根水。最好用地膜盖盘种植。如早春种辣椒一样。   　　三、育苗方法   　　 1、罗汉果传统的育苗方法是无性压蔓繁殖　一般以幼龄小茹种植繁殖为主，因幼龄茹很少结果，营养苗多，压蔓容易成活，繁殖数高，成年茹一般进入结果年龄，生殖苗占多数，很少有营养苗，压茹繁殖系数低。   　　2、繁殖育苗方法：　在新建的果园种植幼龄种茹，按一般种植方法，一年追施3～4次肥料，以人粪尿为主，到寒露至秋分之间，气温下降，昼夜温差大，茎蔓芽梢自然转白时，在晴天或雨后转晴及时压蔓。压蔓方法，就是挖一个穴深2～3寸，将3～5个芽梢平放穴中，芽梢向内，上盖5寸左右的土层，以压住芽梢5寸长左右为宜，40天后便可以长成茹块。十一月下旬至12月上旬采收，集中贮藏过冬，可以沙藏、窑藏也可以就地保留越冬，翌年再取出种植。   　　3、组织培养法。   　　四、罗汉果搭棚技术   　　 计划结果的果园 ： 在种植或种茹萌芽之前搭好棚架，棚架高5尺左右，视管理人员高矮灵活掌握，以便于施肥管理和授粉操作为原则。果棚的大小可根据需要而定，地脚平第一畦，先在地头最上一畦延伸2米。从地的上方逐行往下搭，桩子应安排在畦面中心，便于行走管理。搭棚材料可就地取材。桩子可用杂木、杉木，也可以要水泥柱，横条可用杉木、杂木条，桩子是水泥柱的，还可以用大号铁丝拉成横条，架棚时，一根横条要埋2～3个柱，桩面横架竖条，竖条上面架竹子，竹尾或竹编，竹子尾朝上，桩子横条及竹尾用藤子或铁丝捆牢固。这样搭棚一年，可连续使用3～5年。现在棚面可采用尼龙网代替竹尾了，方便又耐用。   　　五、罗汉果果园的土壤管理   　　1、宿根地的管理：　在开蔸前进行松土，除尽杂草，清理根群，这次松土深挖7～8寸（逐年加深），发现较长的根，要用刀平种茹10～12厘米处剪断，利于另发新根吸收养分。   　　2、新果园和宿根园要及时除草　一年除草3～4次，或用除草剂除草2次，也可以达到除草要求，而且省工。入冬后果蔓枯死，最好彻底进行一次果园清理。   　　3、园地覆盖：　罗汉果果园地覆盖稻草或杂草，具有冬季保温增温，夏季降温保湿防旱作用。使罗汉果增产增收，进行果园覆盖是一个良好措施。覆盖方法是在果园覆盖一层5～7厘米厚的草层。果园覆盖与不覆盖观察结果八月份盖草的土壤含水量74.4%，对照为56.6%，相差17.8%，土温盖草的为27～30℃，对照29～40℃，相差2～9℃。冬季调查土温：盖草的为9～9.5℃，对照为7℃，相差2～2.5℃。八月份观察植株表现情况为盖草处理的叶片生长正常，浓绿色，不萎垂，长势好，花蕾多而壮，果实均匀，大中果多，对照处理的叶片萎垂，并有不同程度萎卷，花朵黄弱，开花后座果少，果实大小不均匀，小果偏多。   　　4、冬季种茹的管理　冬季覆盖土雍蔸是保护种茹不受冻坏，安全越冬，使明年发芽整齐，提高发芽率和产量的一项措施，据我们试验观察冬前覆土雍蔸，对生长发芽有一定的影响，发芽率增加8%。   　　六、成年罗汉果植株的培管   　　1、春季清园开蔸：　在春分至清明前后，温度上升，掌握在晴天进行开蔸，把冬前雍的土挖开露出基头，开蔸时结合清理上年的枯蔓、落叶、杂草全部集中烧掉或深埋。   　　2、留芽扶苗：　在种茹抽梢时，为了集中营养，选留最粗壮的一条芽梢做母蔓，其余全部抹掉，并注意及时扶幼苗上棚。在种茹边插一条竹子（木条）长约5尺，随幼苗攀缘生长，每5～8寸，逐须用竹麻或棕叶扶梆上棚，上棚后，为了促使分生侧蔓，待主蔓上棚1米左右摘心，以扩大棚面苗架，利于夺取高产。   　　3、肥料合理施用：　罗汉果生长期较长，整个生长期达210～250天，不同的生长发育阶段对肥料种类和追肥料数量要求不同，由于罗汉果生长速度快、花期长、根系发达、吸肥能力强，而且花果并存时间需要消耗很多养分，在保证当年高产的同时，又能连年持续高产稳产，不仅要有充分的肥料补充养分，还有合理适用施肥，满足罗汉果正常生长发育，夺取高产。施肥要看苗、看季节，分品种合理施用，青皮果、长滩果要基肥、追肥并重；拉江果在下足基肥的基础上，前期少追肥，中后期酌量增施。如前中期施肥过多，容易引起徙长不结果，罗汉果全年施肥6～8次，第一次在开蔸或种植时重施一次基肥（保温肥），由于早春开蔸时，土温低，春季雨水多，所以这次施肥应以温性长效的猪牛粪或麸为主，在种茹基部上方1～1.5尺左右开半圆形的施肥沟，深4寸左右，每蔸施放猪牛粪5～6斤拌过磷酸钙34两和土拌匀，然后上面盖土铺平，如新植蔸，每蔸施3～4斤猪牛粪即可，第二次施肥为催苗肥，立夏前后，苗高2～3尺时，追施氮肥为主，按100斤稀粪水加尿素2斤的浓度，每蔸追施2～3斤；第三次在主蔓上棚时，此时罗汉果已有一定叶面积便开始萌发侧蔓可以施一次分枝肥，以人粪尿为主，配合少量化肥，施肥量可以逐次增多，在第二次施肥前一个星期，对棚底下弱细苗，要增施一次肥料，促进均匀生长；第四次在6月下旬至7上旬，罗汉果大部分植株呈现花蕾时，施一次促花肥，以人粪尿和麸为主，配合少量化肥（磷钾肥或复合肥料），这次肥料宜重施；第五次，7月下旬第一次盛花期后，再施一次速效肥料，人粪尿和速效化肥混施，这次肥料主要是保果促花，满足果实生长发育和花芽继续分化所需的养分；第六次，立秋前后，8月上、中旬，大批果实发育阶段，紧接着第二次盛花期到来时，为保花保果，提高结实率，多开花，这时宜重施一次速效肥，施人粪尿、菜（花生）麸水或复合肥（菜麸经沤熟后用、化肥和农家肥混合液施，化肥浓度不超过2%。在当年结果较多和结果迟的在8月底9月初还要施一次尾肥，可施稀粪水或麸水，对壮大果实和提高尾果成果率有很好的作用。根据罗汉果根群生长特点，追肥距离应逐次扩大。在6月至8月份，叶蔓迅速生长，正月值开花挂果盛期，常出叶片花斑状失绿、黄化等生理缺素病，影响生长发育，在追肥时注意补充钾素肥料，喷施微量元素肥料，如硫酸锌、磷酸二氢钾等，还可以喷生长调节剂、九二0、植物龙、绿旺1、2、3、7号、高氮叶面肥、高钾叶面肥各浓度为0.1%等作根外追肥。   　　4、雄株的管理和授粉   　　（1）雄株的管理：　雄花与雌花花期能否相遇，这是一个重要问题，可直接影响产量，生产上不但应考虑雄株的搭配，还要进行科学管理。   　　①按比例搭配雄株　一般种植400株以上的母株，每100株配种一株雄株；种植在300株以内，每60～80株配置一雄株，而且应有早、中、晚开花的雄株，保证整个花期有足够的花粉。   　　②采用幼龄雄株和老龄株结合，老龄植株开花早、花期短，而幼龄雄株开花迟、花期长，可以相互弥补，花期相遇。   　　③进行高节位和低节位留芽长苗，也可以解决花期不遇的问题。高节位留芽，上棚早、开花早，但花期短；低节位留芽，长苗慢，开花迟，但花期长。   　　④雄株冬季保温过冬：　冬季种茹盖土越冬时，在上面盖上一层草或尼龙保温，地上蔓用尼龙包扎防冻保温过冬，开蔸后用尼龙保温，可以促进早生长。除采取以上措施外，还要加强肥水管理，开蔸施保温肥，长苗后薄勤施肥料，7～10天追一次，以人粪尿或磷钾为主，可以解决授粉问题。   　　（2）授粉技术： 罗汉果雌雄异株。在栽培长滩果、拉江果、青皮果等品种时，需人工异花授粉（点花）才能正常结实(  　　七、罗汉果主要病虫害及防治　   　　罗汉果病虫种类多，地下部份有根结线虫、根腐病、病毒病、蛴螬、白蚁等为害；地上部份有炭疽病、叶斑病、疮叶从枝病、白粉病、缺素病、蟋蟀、红蜘蛛、黄守瓜、叶蝉、蠓甲、蝽蟓、金龟子、蚜虫、毛虫、果实蝇等为害。根结线虫病是目前罗汉果生产上的一大病害，是防治病害的主要对象。   　　1、根结线虫病　主要为害根及根茹为群众称生泡胫，用3%米乐尔颗粒剂2～3kg/亩撒施或用0.2%爱诺虫乳油2000～3000倍喷土后搅拌。或10%来线磷颗粒剂2～3 kg/亩撒施。   　　2、疮叶丛枝病、病毒病 1.6%植物龙水剂1000～1500倍液或0.5%净土灵水剂500～600倍或2%病毒A500～700倍或28.5%病毒绝杀1000～1200倍或强力克病毒600～800倍液喷施。   　　3、白粉病　用25%叶班清乳油4000～5000倍或朴菌特1200～1500倍或丰果1000～1500倍。   　　4、花叶病、缺素病　黄叶敌50g兑水50～80 kg喷雾或绿旺1、2、3、7号、高氮叶面肥、高钾叶面肥浓度均为0.1%或针对缺哪种微量元素就喷施哪种微量元素，如缺锌就喷硫酸锌0.2%，缺铁就喷硫酸亚铁0.2%等等。   　　5、炭疽病　用70%甲基托布津800倍或25%火把可温性粉剂1000～1500倍，80%新万生可湿性粉剂600～800倍或40%双吉悬浮剂600～800倍。  【罗汉果的组织培养】　　尼龙套袋保苗　剪长2尺，宽一头6寸，一头一尺的尼龙薄膜，烫头烫成喇叭形尼龙套，于早春幼芽萌发后平地面和笔直杆一起套上，以后随苗长高，再拉上一段绑好，直至上棚，可以防止多种害虫侵害，同时还可以防风防寒保苗。   　　人工捕捉　幼苗抽梢后，每天早上或旁晚进行检查，发现有虫危害及时捉拿。   　　喷洒90%敌百虫或80%敌敌畏1000～1500倍液，可防治黄守瓜、毛毛虫、蝽蟓、叶蝉等虫害。   　　喷80%敌敌畏800倍液或40%乐果800倍液加杀螨类的药物，可防治螨类，还可以兼治其它多种害虫。   　　喷灭扫利2000倍可以防治蟓甲虫、金龟子。    　　11、在果实蝇活动盛期，用90%敌百虫1两加糖3斤加水100斤喷洒果叶，每7天喷一次，连续2～3次，可收到良好的效果。   　　罗汉果病虫防治要以防为主，加强管理，注意果园清洁，开蔸前或种芽发芽之前，清理果园，收集落叶落果、枯蔓，集中烧掉，消灭超冬病虫源。另外，必须综合防治，如采取降低地下水位，排除山水，选用无病种茹种苗，减少氮素化肥施用量，增施钾肥及有机肥，可提高抗病能力，减轻病虫的为害。地上危害芽梢、叶片及茎蔓的害虫，在罗汉果生长的各个时期都能危害。因此，在罗汉果各个生长时期都要进行及时防治。

篇二 罗汉果的组织培养
罗汉果种植方法和加工技术

　　[农广天地]罗汉果种植方法与加工技术(20160314)　

　　本期节目主要内容： 罗汉果属葫芦科，是人们熟知的止咳良药，除了作为中医，它所具备的食用功效你又了解多少？你见过罗汉果的鲜果长啥样吗？本片将带领观众朋友们一起走进罗汉果之乡的广西永福县，为大家讲解这药食两用的罗汉果种植方法与罗汉果加工技术。 （《农广天地》 20160314 罗汉果种植与加工）

　　

　　

　　

　　

　　罗汉果标准化种植技术总结：
　　
　　1　园地选择
　　
　　选择罗汉果标准化种植示范基地主要考虑以下因素：一是排灌水方便；二是背风向阳，土层深厚肥沃，坡地或水田均可。关键是改变了毁林开荒的传统做法，实行下山种植，年年换新地，采取轮作制。以利于保护森林资源，避开病原虫原，减少农药施用，有利于生态环境保护。
　　
　　2　园地开垦和整地
　　
　　2.1　开垦
　　对适宜种植罗汉果的荒山和荒芜果园，选择在夏秋砍树炼山。炼山后，秋末进行全垦，深挖30～40cm。全垦深挖后让其曝晒风化越冬，加速土壤熟化，改良土壤理化性质，提高土壤肥力，消灭病虫害。
　　
　　2.2　整地
　　对新开垦的荒山和荒芜果园，第二年在种植前2～3月间翻垦松土1次，将土块打碎整细，按等高线开220～250cm宽的等高畦。在水田和平地，整成畦面宽180cm、高25cm的畦，畦间留40cm宽的排水沟。
　　
　　3　种植罗汉果
　　
　　种植时间：在3月20日～4月30日之间，选择暖和的晴天种植。
　　种植密度：株行距为180cm×(220～250)cm。667m²植148～168株。
　　品种选择：近年选用莱茵生物应用有限公司的红毛1号、龙青1号和龙青2号及广西农科院组培苗公司的青冠等优良组培苗进行种植。
　　种植方法：挖30cm见方的定植坑，每坑用3～4kg腐熟的基肥与土拌匀作基肥，上再覆细土10～15cm隔离，以免种苗接触肥料引起烧伤。种植时用左手的食指和中指轻轻夹住营养杯苗的基部，双手将营养杯倒置在左手上，用右手将杯取下，然后双手将苗及营养土放入定植穴中，用细土盖没营养土，用双手将土压实。种植后淋定根水，距苗10cm于4角插4条50cm长的竹竿(棍)，最后用两头通的薄膜袋套下，底部周围用土压紧。套袋既能避风保温又能防虫护苗，有效提高种植成活率。
　　配置授粉树；每100株配2株雄株。
　　
　　4　搭棚
　　
　　种植罗汉果的棚架在5月底前搭好。棚高2m左右，便于施肥、管理和授粉。选用2.4m长的杉木和竹尾做立桩，在株距间均立桩，埋入土中40cm。桩顶横直用铁丝拉紧固定，然后铺盖尼龙网即可。
　　
　　5　整形修剪
　　
　　主蔓上棚前，及时抹除侧芽，摘去卷须。苗高30cm后，插一竹枝，引主蔓上棚架。主蔓上棚后6～8叶时，留4～5节摘心，选留一级蔓2条；一级蔓6～8叶时，又留4～5叶摘心，每条留二级蔓2条；二级蔓6～8叶时，再留4～5叶摘心，每条留三级蔓2～3条，任其生长。来籽点花。疏剪四级侧蔓。各侧蔓合理均匀分布于架面，形成一个自然扇形的骨架。
　　
　　6　施肥
　　
　　6.1　基肥
　　种植前1～2月，将猪牛粪等农家肥2000kg、麸肥100kg、过磷酸钙100kg拌匀堆沤，让其充分发酵腐熟后作基肥。种植时，每穴施用3～4kg，与土拌匀。
　　
　　6.2　追肥
　　种植罗汉果第一次追肥：种植一周时，每株施沤熟人粪尿0.25kg加水2kg；第二次追肥：主蔓50cm高时，每株施沤熟人粪尿0.5kg加水4kg；第三次追肥：7月中、下旬，盛花期，每株施沤熟人粪尿0.5kg加桐麸0.5kg加水8kg。复合肥O.3kg，距主干50cm处开环状浅沟施入；第四次追肥：8～9月大批果实迅速发育膨大阶段，再施1次追肥，每株施沤熟人粪尿O.5kg加桐麸0.5kg加水8kg。复合肥O.3kg，距主干50cm处开环状浅沟施入。
　　
　　7　授粉
　　
　　在清晨5～9时采摘发育良好含苞待放或微开的雄花，放置阴凉处备用。待雌花开放时用雄花轻轻地抹到雌花的柱头(花心)上，一朵雄花可授粉10～20朵雌花。一天每人可授粉5000朵花。罗汉果的授粉工作应在上午完成。
　　
　　8　病虫害防治
　　
　　(1)种植罗汉果前施基肥时，株施虫菌克绝5g与土拌匀。防治地下害虫。
　　(2)4月下旬开始，每隔1～2周防治一次黄守瓜、红蜘蛛、叶蝉、蚜虫、蝽象、象鼻虫等，连续喷药3～4次。交替使用90％敌百虫1000～1500倍液，80％敌敌畏乳油800倍液，或40％乐果800倍液。
　　(3)5月上旬，株施福气多5g或线虫必克5g，6月下旬，株施福气多8g或线虫必克8g，防治线虫病。
　　(4)5～6月，喷施阿米西达800倍液防治炭疽病，连续2～3次。
　　(5)8～9月，用90％敌百虫25g，红糖1.5kg，加水50kg，喷洒果叶茂密处，每7d1次，连续2～3次，以诱杀罗汉果实蝇。
　　
　　9　采收
　　
　　在罗汉果果柄枯黄充分成熟时采收。采收时用剪刀剪下，把花柱与果柄剪平。采回的果放在木板上摊开，适时销售和进行罗汉果加工。  

篇三 罗汉果的组织培养
组培苗罗汉果生产标准操作规程

篇四 罗汉果的组织培养
罗汉果组培苗种植存在问题及解决措施

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广西农业科学　2003年第4期

罗汉果组培苗种植存在问题及解决措施

林　纬,　黎起秦,　彭好文,　薛进军,　梁　松,　黄林燕

(广西大学农学院　南宁　530005)

摘　要:罗汉果组培苗在广西永福、临桂、融安等县试种推广,,病,种植成活率低,存在不结果或结果小、留种薯腐烂等问题,培育无病壮苗,推广精细栽培管理,,。关键词:罗汉果;脱毒苗;生产;中图分类号:S66819

B　　

文章编号:10028161(2003)04007402

oftissueculturedseedling

cultivationofMomordicagrosevenori

LINWei,LIQiqin,PENGHaowen

(AgricuturalCollegeofGuangxiUniversity,Nanning530005,China)

Abstract:theLowyieldhistorywasalteredwiththeextensionoftissue-culturedseedlingsofMomordicagrosvenoriinYongfu,LinguiandRong’anCountiesofGuangxi,buttheproblemsofmosaicdiseasesusceptibility,

lowsurvivalratio,nonbearingordegenerationoffruitandseedtuberrothaveemergedwiththeextension.Solu2tionsoftheproblemsinclude:touserecommendedvarities,tocontrolstrictlyvirusraisetheyieldandthequalityoftheproduct.

Keywords:Momordicagrosvenori;virusfreeseedling;production;problem

freeprocessing,tospread

finecultivatedtechnologyandtocontrolpestsanddiseasesintime.Thesewillreducetheharmfromdiseasesand

　　罗汉果为葫芦科多年生宿茎攀缘藤本植物,每

年夏秋开花结果。果实泡茶或浸酒饮用,具有清热解毒,润肺定喘,化痰止咳,益肝健脾,提神生津和促进肠胃消化等功能,对防治和缓解糖尿病,治疗冠心病和预防血管硬化等有一定功效,被誉为东方神果。干果及深加工制品罗汉果冲剂饮料和浓缩汁等远销国内外市场,产品供不应求。

罗汉果主要采用块根和压蔓的无性繁殖方法,由于长期采用无性繁殖,产量与品质下降,尤其是病原物随繁殖体传播,使罗汉果种植区病毒病发生严重,其中花叶病发生最重。另外,栽培品种退化,品种单一,使罗汉果部分品种面临绝种的危险[1]。近年来,采用组织培养方法脱毒获得无病罗汉果种苗取得重要进展[2]。2001～2002年,我区罗汉果组培苗应用于生产,对当地农民增收起到很大的作用,改变了罗汉果产量低的历史,但在病害防治、种苗成活

收稿日期:20030310

作者简介:林纬,男,1964年生,广西昭平人,农艺师。

率、产果率等技术方面尚需进一步研究解决。现就目前罗汉果生产仍存在的问题作一些分析。

1　罗汉果组培苗生产中的几个问题

111　感染花叶病毒

2002年6～9月,笔者调查了广西5个县9个乡(镇)58019株罗汉果组培苗种植情况,结果是:病毒病病株率平均为13.9%,发病最轻的占5.0%,发病重的占63.0%。第二年留种薯种植的,病株率过93.0%。发病严重的原因有以下几方面:第一,组织

培养的种苗带毒。继代增殖前没有经过严格的血清学检测,用于组织培养的材料带毒;第二,种苗出圃时未经检疫或育苗大棚无防虫设施(防虫网),致使育苗过程中罗汉果苗带病毒;第三,种植过程中感染病毒。罗汉果人工抹芽、授粉及汁液摩擦可能感染病毒。罗汉果从苗期到开花结果期需3～5天进行一次人工抹芽,抹芽时不分健康株、病株,随意抹芽,会造成人为传染病毒;第四,昆虫传毒。罗汉果花叶病的传媒介体主要是蚜虫;第五,罗汉果花叶病毒寄主植

林纬等:罗汉果组培苗种植存在问题及解决措施

・75・

物范围广,西瓜花叶病毒-2能够侵染罗汉果和西葫芦、南瓜、黄瓜、西瓜、毛节瓜等葫芦科植物和藜科的苋色藜,果园附近种植这些植物,昆虫传毒或人为传毒,会导致病害严重发生;第六,品种单一。目前生产上种植的主要是青皮果品种,容易感染病毒病。112　种植成活率低

近两年来,为避免因采用罗汉果种薯种植而出现品种退化及病毒传播现象,我区各地农户采用罗汉果组培苗进行栽培,但种植成活率较低,一般为70%～80%,有的仅为50%左右。根据笔者观察和试验,造成罗汉果组培苗死苗的主要原因,种苗质量差。组培苗过于细弱成团的愈伤组织,够,;,施肥,也会引起死苗。或因不注意防虫,罗汉果组培苗幼苗被蟋蟀等地下害虫咬断而造成缺苗。

113　不结果或结果小【罗汉果的组织培养】

据调查,有的组培苗不结果,只长苗(跑苗),有的组培苗结果极少,或只结小果,果径小于4.5cm。其原因之一是组培苗的质量问题,生长前期缓慢,延误结果期。或组培苗生产过程中使用激素不当及无限度扩繁(增繁代数高);另一方面是种植管理技术不当,如种植季节迟,水肥不当,氮肥过量,缺少磷钾肥,没有采取疏花疏果等措施。114　种薯腐烂

罗汉果组培苗种植后第2年地下茎种薯出现腐烂现象。罗汉果组培苗定植后,前期生长慢,中后期生长十分旺盛,当年形成种薯经过的时间短,积累物质少,水分多,种薯表皮薄、嫩,冬季割蔓后,引起水分蒸腾(伤流),病菌易侵染等,较容易造成地下茎根

腐烂。

2　技术措施

解决罗汉果组培苗在生产中存在的问题,笔者认为应采取以下措施。第一,要注意品种资源的研究、开发、利用,选用高效抗病的品种。从现有的品种中选择优良单株,定向培养,,严格把好种;第二。、烂薯的措,1000～5000倍消,使第2年种薯顺利出。。经常抹芽,适时留蔓。定植前施足腐熟有机肥。前期多施N肥,中期多施

产量;第三,组培P、K肥。注重疏花疏果提高品质、

苗要求做到不带病毒。病毒病目前还没有防效较好的药剂,主要防治措施是铲除毒源,消灭传播介体等。无性繁殖材料是重要的传播途径,建立无病毒优良种苗的推广繁殖体系是解决病毒危害,实现高产优质的一项重要措施。应尽快制定和完善罗汉果病毒检测规程。规范罗汉果种苗的生产,强化种苗的管理;第四,加强对罗汉果组培苗优质高产栽培技术及病害综合防治的宣传,开展形式多样的宣传和技术培训活动,指导农户科学合理使用农药、肥料,以达到高产优质目的。职能部门应高标准、高质量地建设一批示范园,通过示范园的辐射作用,推广罗汉果无病毒栽培技术。

参考文献

1　杭玲,陈丽娟,陈少珍等.罗汉果茎块脱毒快繁技术[J].

西南农业学报,1999,12(3):125～127.

2　梁一池,杨华1植物组织培养研究进展[J].福建林学院

学报,2002,22(1):1～3.

鸡蛋大小的控制

鸡蛋的大小在很大程度上是由遗传因素决定的,但为适应某些特定市场的需要,我们可以在一定的范围内调整鸡蛋的大小,这需要在以下几个方面的饲养管理中给予特别的注意。

1.饲养方式:在相同环境条件下,笼养鸡所产的蛋通常比平养鸡

较高而蛋重较小;产蛋鸡舍温度在27℃以上时,温度越高,母鸡产的蛋就越小,当鸡舍温度高于37℃时,可引起母鸡停产或死亡。

5.营养:鸡蛋的大小,在很大程度上还受粗蛋白、特定的氨基酸(如蛋氨酸、胱氨酸)、能量、脂肪以及必要的脂肪酸如亚油酸等摄入

量的影响。低蛋白水平的日粮可以降低蛋重,降低蛋氨酸含量虽然使蛋重下降,但同时也引起产蛋率的下降。另外,在饲料中改变维生素含量也能引起蛋重的变化。日本农林水产省畜产实验室的研究人员发现,在饲料中掺拌亚油酸可促进蛋重增加,当亚油酸的比例提高到2.83%时,蛋重达到59.6g;如果所产的鸡蛋过大,只要在饲料中添加牛黄酸0.5%就可以使蛋重变小1g。

总之,调整饲养管理方式,提高某些营养成分的水平,可以增加早期鸡蛋的重量,然后用逐渐减少饲料中的营养成分来控制以后蛋的重量大小,以适应市场的需要。

摘自《养禽与禽病防治》

产蛋重量稍大一些。

2.成熟期体重:母鸡在开产时的体重越重,它在一生中所产的蛋

也就越大。为了获得最大的蛋,在母鸡体重达到1500～1600g以前,不能用光照刺激的办法来促使性成熟。

3.开产日龄:这与鸡的体格大小有关,但总的来说,鸡开产日龄

越早,蛋的重量就越小,反之,开产日龄越晚,所产的蛋重就愈大。由于延长开产日龄是可以办到的,所以在经济上应该将开产日龄作为重要因素进行考虑。

4.季节和气温:春季开产的母鸡与秋季开产的母鸡相比,产蛋率

篇五 罗汉果的组织培养
罗汉果的组织培养与农杆菌介导遗传转化体系的建立研究 (1)

广西大学

硕士学位论文

罗汉果的组织培养与农杆菌介导遗传转化体系的建立研究

姓名：高菊

申请学位级别：硕士

专业：作物遗传育种

指导教师：韦鹏霄

20040501

广西大学硕士学位论文罗汉果的组织培养与农杆菌介导遗传转化体系的建立研究

罗汉果的组织培养与农杆菌介导遗传转化

体系的建立研究

摘要

本论文以青皮果和圆形红毛子两个罗汉果品种为材料，系统地研究了罗汉果的组织培养，建立了农杆菌介导的罗汉果遗传转化体系，成功地获得了罗汉果ＧＵＳ基因转化植株，并进行了检测。研究结果包括：

ｌ、不定芽的直接分化途径可作为罗汉果组织培养的主要途径；脱分化途径产生的罗汉果愈伤组织分化频率低，不利于罗汉果组织培养。

２、叶片、腋芽是罗汉果组织培养的适宜材料，直接分化不定芽的频率高；愈伤组织的诱导分化以腋芽为外植体的芽分化率相对较高。

３、罗汉果叶片的分化培养基以ＭＳ＋６．ＢＡ２．０ｍ叽＋ＩＢＡＯ．５ｍ乩为最佳，分化率为６１．９％，平均芽数为５．４８个／块；腋芽的分化培养基以ＭＳ＋６．ＢＡｌ．Ｏｍｇ／Ｌ＋ＩＢＡ０．Ｓｍ班最佳，芽分化率达９８．９％，平均芽数５．２７个／块。

４、在２～５代继代培养中，随继代增殖代数增加，罗汉果叶、芽直接分化芽的能力不断下降。

５、罗汉果愈伤组织的芽分化率随愈龄的增加而下降，以５天愈龄的愈伤组织芽分化率最高，分化率为８％。

６、罗汉果不同部位叶片、腋芽的芽分化效果存在差异，以发育较成熟的３～４节问的叶片、腋芽的芽分化率最高，分别达到４８．７％幂１ａ９６．９％。

７、罗汉果二次培养苗叶片仍具有较高的分化能力，青皮果芽分化率可达６５％，圆形红毛子芽分化率可达５０％。８、罗汉果组培苗的生根壮苗培养以１／２ＭＳ＋ＩＢＡｏ．８￣１胁ｇ，Ｌ＋ＭＥＴｏⅧ６。∥Ｌ

广西大学硕士学位论文罗汉果的组织培养与农杆菌介导遗传转化体系的建立研究为最佳培养基，生根率达１００％，根数约为５．５～６．０３条／苗。

９、罗汉果叶盘的Ｋｍ基础抗性浓度为６ｍｇ／Ｌ，罗汉果非转化体在含Ｋｍ的培养基中难以分化出根。

１０、罗汉果预培养４天后进行转化，ＧＵＳ基因的瞬时表达效果最好。瞬时表达检测发现：２１．７％叶盘被全面染成较深蓝色，６９．６％【１－Ｊ－盘边缘和内部均有较深蓝斑，８．７％叶盘边缘被染成蓝色。瞬时表达率达１００％。

１１、罗汉果叶盘在菌液浓度ＯＤ６００≈０．１～Ｏ．５的农杆菌中浸泡５－－－６０秒后，共培养４８小时，ＧＵＳ瞬时表达效果最佳，瞬时表达率为１００％。

１２、先再生后选择的转化体筛选方法导致大量假转化体形成，而先选择后再生，结合生根筛选，能有效去除假转化体。

１３、ＧＵＳ基因能在罗汉果完整植株中稳定表达，已获得罗汉果ＧＵＳ基因转化植株。关键词：罗汉果组织培养遗传转化根癌农杆菌ＧＵＳ基因

广西大学硕士学位论文罗汉果的组织培养与农杆菌介导遗传转化体系的建立研究ＳＴＵＤＩＥＳＯＮＴＩＳＳＵＥＣＵＬＴＵＲＥＡＮＧＥＳＴＡＤＬＩＳＨＭＥＮＴｏＦ彳ＧＲ吲Ｃ７Ｅ足，ｍＭＥＤＩＡＴＥＤＴＲＡＮＳＦｏＲＭＡＴＩＯＮＯＦＳＺＲ４，ＺＺ４ＧＲＤＳ陋！ⅣＤＲ玎（ＳＷＩＮＧＬＥ）Ｃ．ＪＥＦＦＥＲＹ

ＡＢＳＴＲＡＣＴ

Ｉｎｔｈｉｓｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ，ｔｗｏｖａｒｉｅｔｉｅｓｏｆＳｉｒａｉｔｉａ

Ｊｅｆｆｅｒｙｔｈａｔｎａｍｅｄｇｒｏｓｖｅｎｏｒｉｉ（Ｓｗｉｎｇｌｅ）Ｃ．Ｑｉｎｇｐｉｇｕｏ

ｏｆａｎｄｍａｔｅｒｉａｌｓ．Ｔｈｅ【罗汉果的组织培养】

ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｓｙｓｔｅｍｔｉｓｓｕｅＹｕａｎｘｉｎｇｈｏｎｇｍａｏｚｉｗｅｒｅｕｓｅｄａｓｔｈｅｃｕｌｔｕｒｅａｎｄａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ．ｍｅｄｉａｔｅｄｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄａｎｄｏｆＳｉｒａｉｔｉａｇｒｏｓｖｅｎｏｒｉｉｗａｓｓｏｍｅＧＵＳｔｒａｎｓｇｅｎｉｃｐｌａｎｔｓｏｆＳｉｒａｉｔｉａｇｒｏｓｖｅｎｏｒｉｉｈａｄｂｅｅｎｏｂｔａｉｎｅｄｓｕｃｃｅｓｓｆｕｌｌｙ．ＴｈｅｒｅｓｕＲｓｏｆｓｔｕｄｙｗｅｒｅｉｎｃｌｕｄｅｄｉｎｔｈｅｆｏｌｌｏｗｉｎｇ．

１．ＴｈｅｐａｔｈｗａｙｏｆａｄｖｅｎｔｉｔｉｏｕｓｂｕｄｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｍａｙｂｅｃｏｍｅｔｈｅｍａｉｎｐａｔｈｗａｙｏｎｔｉｓｓｕｅｃｕｌｔｕｒｅｏｆｔｈｅＳｉｒａｉｔｉａｇｒｏｓｖｅｎｏｒｉｉ．Ｔｈｅｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｒａｔｅｏｆｃａｌｌｕｓｐｒｏｄｕｃｅｄｂｙｔｈｅｐａｔｈｗａｙｏｆｄｅｓ－ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｗａｓｌｏｗ，ｗｈｉｃｈｗａｓｄｉｓａｄｖａｎｔａｇｅｔｏｔｉｓｓｕｅｃｕｌｔｕｒｅｏｆＳｉｒａｉｔｉａｇｒｏｓｖｅｎｏｒｉｉ．

２．ＴｈｅｌｅａｖｅｓａｎｄｂｕｄｓｗｅｒｅｔｈｅｓｕｉｔａｂｌｅｍａｔｅｒｉａｌｆｏｒｔｉｓｓｕｅｃｕｌｔｕｒｅｏｆＳｉｒａｉｔｉａｇｒｏｓｖｅｎｏｒｉｉ，ｗｈｉｃｈｓｈｏｗｅｄｔｈｅｈｉｇｈｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｒａｔｅｏｆａｄｖｅｎｔｉｔｉｏｕｓｂｕｄｓ．Ｔｈｅｂｕｄｓｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｒａｔｅｏｆｃａｌｌｕｓ，ｗｈｉｃｈｉｎｄｕｃｅｄｂｙｔｈｅａｘｉｌｌａｒｙｂｕｄｓ，ｗａｓｈｉｇｈｅｒｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅｌｙ．

３．Ｏｎｔｈｅｌｅａｖｅｓｃｕｌｔｕｒｅ．ｔｈｅｏｐｔｉｍａｌｍｅｄｉｕｍｏｆｔｈｅｂｕｄｓｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｗａｓＭＳｍｅｄｉｕｍｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔｅｄｗｉｔｈ２．０ｍｇ’Ｌ。ＢＡａｎｄ０．５ｍｇ‘Ｌ—ＩＢＡ．ｔｈｅ

ｒａｔｅｗａｓｂｕｄｓｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ６１．９％，ａｎｄａｖｅｒａｇｅｎｕｍｂｅｒｏｆｂｕｄｓｗａｓ５．４８．

Ｏｎｔｈｅａｘｉｌｌａｒｙｂｕｄｓｃｕｌｔｕｒｅ，ｔｈｅｏｐｔｉｍａｌｍｅｄｉｕｍｏｆｔｈｅｂｕｄｓｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｗａｓＭＳｍｅｄｉｕｍｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔｅｄｗｉｔｈ１．０ｍｇ・Ｌ“ＢＡａｎｄＯ．５ｍｇ・Ｌ—ＩＢＡ．ｔｈｅ

ｒａｔｅｂｕｄｄｉｔｉｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｗａｓ９８．９％．ａｎｄａｖｅｒａｇｅｎｕｍｂｅｒｏｆｂｕｄｓｗａｓ５．２７．

广西大学硕士学位论文罗汉果的组织培养与农杆菌介导遗传转化体系的建立研究

４．Ｉｎ２－５ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎｓｕｂｃｕｌｔｕｒｅ，ｔｈｅｃａｐａｂｉｌｉｔｙｏｆｂｕｄｓｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｗａｓｄｅｃｌｉｎｅｗｉｔｈｔｈｅｌｅａｖｅｓｓｕｂｃｕｌｔｕｒｅｔｉｍｅｉｎｃｒｅａｓｉｎｇ．

５．Ｔｈｅｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｒａｔｅｏｆｔｈｅｃａｌｌｕｓｗａｓｄｒｏｐｗｉｔｈｔｈｅｃａｌｌｕｓａｇｅｉｎｃｒｅａｓｉｎｇ．Ｗｈｅｎｔｈｅｃａｌｌｕｓａｇｅｗａｓｆｉｖｅｄａｙｓ，ｔｈｅｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｒａｔｅｗａｓｔｈｅｈｉｇｈｅｓｔ，ａｎｄｔｈｅｒａｔｅｗａｓ１４％．

６．Ｔｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｔｈｅｂｕｄｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｗｅｒｅｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｉｎｔｈｅｄｉｆｆｅｒｅｎｔｐｏｓｉｔｉｏｎｏｆｔｈｅｌｅａｖｅｓａｎｄａｘｉｌｌａｒｙｂｕｄｓ，ｗｈｉｃｈｔｈｅｌｅａｖｅｓａｎｄａｘｉｌｌａｒｙｂｕｄｓｌｉｅｄｉｎ３－４ｎｏｄｅｓｈｏｗｅｄｔｈｅｈｉｇｈｅｒｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｒａｔｅｏｆｂｕｄｓ．Ｔｈｅｒａｔｅｗａｓ９６．９％ａｎｄ４８．７％．

７．Ｔｈｅｌｅａｖｅｓｏｆｓｕｂｃｕｌｔｕｒｅｐｌａｎｔｓｔｉｌｌｈａｄｈｉｇｈｅｒｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎａｂｉｌｉｔｉｅｓ。Ｔｈｅｂｕｄｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｒａｔｅｏｆ

ａｎｄ５０％．ＱｉｎｇｐｉｇｕｏａｎｄＶｕａｎｘｉｎｇｈｏｎｇｍａｏｚｉｗａｓ６５％

８．Ｉｎｔｈｅｃｕｌｔｕｒｅｏｆｒｏｏｔｉｎｄｕｃｅｍｅｎｔａｎｄｓｏｕｎｄｓｅｅｄｌｉｎｇ，ｔｈｅｏｐｔｉｍａｌｍｅｄｉｕｍｗａｓ１／２ＭＳｍｅｄｉｕｍｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔｅｄｗｉｔｈ０．８－１．０ｍｇ・Ｌ‘１ＩＢＡａｎｄ０．４～０．６ｍｇ・Ｌ。１ＭＥＴ．Ｔｈｅ

５．５－６。０３．ｒｏｏｔｉｎｄｕｃｅｒａｔｅｗａｓ１００％，ｔｈｅｎｕｍｂｅｒｏｆｒｏｏｔｗａｓ

９．ＴｈｅｓｅｎｓｉｔｉｖｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆＫｍｗａｓ６ｍｇ／ＬＳｉｒａｉｔｉａｇｒｏｓｖｅｎｏｒｉｉ．Ｔｈｅ

ｍｅｄｉｕｍｃｏｎｔａｉｎｅｄＫｍ．ｏｎｔｈｅｌｅａｆ－ｆｒａｇｍｅｎｔｏｆｒｏｏｔｓｏｎｎｏｎ－ｔｒａｎｓｇｅｎｉｅｓｅｅｄｌｉｎｇｃｏｕｌｄｎ’ｔｉｎｄｕｃｅｔｈｅ

１０．Ｗｈｅｎｔｈｅｌｅａｆ－ｆｒａｇｍｅｎｔｏｆＳｉｒａｉｔｉａｇｒｏｓｖｅｎｏｒｉｉｐｒｅ—ｃｕｌｔｕｒｅｄｆｏｒ４ｄａｙｓｂｅｆｏｒｅｂｅｉｎｇｔｒａｎｓｆｏｒｍｅｄ．ＧＵＳｇｅｎｅｅｘｐｒｅｓｓｅｄｐｅｒｆｅｃｔｌｙ．Ｔｈｅｔｅｓｔｏｆ

ｔｏｉｎｓｔａｎｔａｎｅｏｕｓｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｉｎｄｉｃａｔｅｄ：ｔｈｅｌｅａｆ－ｆｒａｇｍｅｎｔｔｈａｔｔｈｅｗｈｏｌｅｄｙｅｄ

ｎａｖｙｂｌｕｅｗａｓ２１．７％，ｔｈｅｌｅａｆ－ｆｒａｇｍｅｎｔｔｈａｔｔｈｅｅｄｇｅａｎｄｉｎｎｅｒｄｙｅｄ

ｔｏｔｏｄｅｅｐｅｒｂｌｕｅ—ｓｐｏｔｗａｓ６９．６％，ａｎｄｔｈｅｌｅａｆ－ｆｒａｇｍｅｎｔｔｈａｔｔｈｅｅｄｇｅｄｙｅｄ

ｗａｓ８．７％．ＴｈｅｒａｔｅｏｆｉｎｓｔａｎｔａｎｅｏｕｓｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｂｌｕｅＷａｓ１００％．

１１．Ｌｅａｆ－ｆｒａｇｍｅｎｔｏｆＳｉｒａｉｔｉａｇｒｏｓｖｅｎｏｒｉｉｗｅｒｅｄｉｐｐｅｄｉｎａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ

篇六 罗汉果的组织培养
罗汉果组培苗营养动态与施肥技术研究

篇七 罗汉果的组织培养
罗汉果组培繁殖的技术要点

本文来源：http://www.guakaob.com/qiuzhizhaopin/850349.html